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微電泳儀的技術(shù)優(yōu)勢(shì)及應(yīng)用

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  在生命科學(xué)領(lǐng)域中,生物分子間的相互作用具有非常重要的作用。通過(guò)分子間相互作用分析不僅可闡明細(xì)胞生物學(xué)事件,而且為疾病發(fā)生機(jī)制和藥物發(fā)現(xiàn)提供基礎(chǔ)。MST技術(shù)是一種基于檢測(cè)在溫度梯度中的生物分子電泳遷移率的變化而檢測(cè)生物分子間結(jié)合、解離過(guò)程,獲取分子間相互作用的模式和動(dòng)力學(xué)常數(shù)等方面信息的新技術(shù),是近年來(lái)發(fā)展的研究生物分子相互作用的強(qiáng)有力工具,已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域研究。
 
  微量熱泳動(dòng)是一種表征生物分子特性的光學(xué)方法,是粒子在微觀溫度梯度中的定向運(yùn)動(dòng)。生物分子的質(zhì)量、電荷、水化層和構(gòu)象發(fā)生改變均可導(dǎo)致分子在溫度梯度場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)速度的變化,這種變化可以用來(lái)分析分子間相互作用以及各種化學(xué)劑量學(xué)參數(shù)。
 
  微電泳儀利用帶電粒子在電場(chǎng)中的遷移速度不同來(lái)實(shí)現(xiàn)分離的技術(shù),通過(guò)測(cè)定粉體的Zeta電位來(lái)認(rèn)識(shí)粉體表面電性,這在粉體表面處理中是一個(gè)重要的手段。

  MST技術(shù)將熒光檢測(cè)的精確性和熱泳動(dòng)的差異性及靈敏性結(jié)合起來(lái),提供了一種靈活、穩(wěn)定和快速檢測(cè)分子間相互作用的方法,在分析分子相互作用中有的優(yōu)勢(shì),不依賴(lài)于分子大小、種類(lèi)的影響,甚至水化層的微小變化也可檢測(cè)到;可檢測(cè)溶液中低至pM濃度的分子間相互作用;樣品消耗量在μL級(jí);可以在復(fù)雜緩沖液中包括血漿和細(xì)胞裂解液中進(jìn)行結(jié)合分析;還可以分析結(jié)合模式和位點(diǎn)數(shù)、蛋白解聚、熱力學(xué)和酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)等,是一種強(qiáng)大的詳細(xì)研究生物分子特征的強(qiáng)有力工具。
 
  在生命科學(xué)的眾多領(lǐng)域已經(jīng)成功使用MST技術(shù)進(jìn)行了不同生物分子間的相互作用定量分析研究。通過(guò)探討分子間有無(wú)結(jié)合、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)量、分子間相互作用親和力等,可為配體、底物、疾病靶點(diǎn)的確定和目標(biāo)物篩選、濃度分析等提供基礎(chǔ),因此,MST技術(shù)在藥物篩選、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、分子檢測(cè)和醫(yī)學(xué)診斷等生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展迅速,對(duì)推動(dòng)基礎(chǔ)生物醫(yī)學(xué)研究和更好的藥物開(kāi)發(fā)有重要作用。
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